フェニルガラクトシド CAS:2818-58-8

酵素活性に対する影響: フェニルガラクトシドは、酵素 β-ガラクトシダーゼの活性を測定するために一般的に使用されます。フェニルガラクトシドがβ-ガラクトシダーゼによって加水分解されると、p-ニトロフェノールが放出されます。p-ニトロフェノールの蓄積は定量的に測定でき、β-ガラクトシダーゼの活性についての洞察が得られます。この効果は、酵素アッセイやスクリーニング システムなどのアプリケーションで利用されます。

遺伝子発現解析: フェニルガラクトシドは、遺伝子発現を研究するための分子生物学実験の基質としてよく使用されます。β-ガラクトシダーゼをコードする lacZ 遺伝子は、通常、他の目的の遺伝子の制御配列と融合されます。lacZ 遺伝子の発現とβ-ガラクトシダーゼによるフェニルガラクトシドの加水分解は、研究対象の標的遺伝子の発現パターンとレベルを示すことができます。

スクリーニングシステム: フェニルガラクトシドは、β-ガラクトシダーゼ活性を利用するスクリーニングシステムの重要な構成要素です。広く知られている例の 1 つは、分子生物学の実験で組換え細胞または形質転換細胞を同定するために使用される青白スクリーニング法です。組換え DNA の取り込みに成功したコロニー、または遺伝子組換えを受けたコロニーは β-ガラクトシダーゼを発現し、フェニルガラクトシドの加水分解と青色の形成を引き起こします。

タンパク質の精製: 場合によっては、フェニルガラクトシドをアフィニティークロマトグラフィーのリガンドとして使用して、β-ガラクトシダーゼに特異的に結合するタンパク質、またはβ-ガラクトシダーゼによって活性化されるタンパク質を精製することができます。目的のタンパク質は、アフィニティータグまたはβ-ガラクトシダーゼ結合ドメインを含む融合タグを有していてもよい。タンパク質混合物をフェニルガラクトシドが固定化されたカラムに通すことにより、目的のタンパク質を選択的に保持し、その後溶出することができます。