4-ニトロフェニル ベータ-D-ガラクトピラノシド CAS:200422-18-0

効果: ONPG は、酵素 β-ガラクトシダーゼの存在と活性を検出するために特に使用される基質です。β-ガラクトシダーゼ酵素が存在して活性化すると、ONPG が 2 つの生成物、o-ニトロフェノールとガラクトース誘導体に切断されます。o-ニトロフェノールが遊離すると黄色に変化し、分光光度計を使用して測定できます。

用途: ONPG は、分子生物学および生化学研究においていくつかの用途があります。

β-ガラクトシダーゼ活性の測定: ONPG は、β-ガラクトシダーゼ酵素の活性を測定および定量するために一般的に使用されます。o-ニトロフェノールの生成速度は酵素活性に直接比例し、分光測光的に測定できます。

遺伝子発現と制御: ONPG は、遺伝子発現と制御の研究に関連する実験でよく利用されます。これは、特定のプロモーターの制御下にある遺伝子の発現を研究するために、一般的に使用される lacZ 融合システムなどの融合タンパク質アッセイで頻繁に使用されます。ONPG を使用して測定されたβ-ガラクトシダーゼ活性は、遺伝子発現レベルについての洞察を提供します。

β-ガラクトシダーゼ活性のスクリーニング: ONPG は、β-ガラクトシダーゼをコードする LacZ 遺伝子の存在と機能を同定するための、組換え DNA 技術における比色スクリーニング方法として使用できます。このスクリーニング方法は、目的の遺伝子を含むクローンを同定するのに役立ちます。

酵素動態の研究: ONPG は、β-ガラクトシダーゼ酵素の動態の研究にも役立ちます。さまざまな基質濃度で酵素と基質の反応速度を測定することにより、ミカエリス メンテン定数 (Km) や最大反応速度 (Vmax) などの反応速度パラメーターを決定することができます。